Preanalytika

 

Pokyny k odběru

Průjmovitá stolice.

Odběr vzorku stolice do kontejneru s širším hrdlem.

Min. 1ml stolice.

Klinické indikace

Diagnostika průjmů s podezřením na etiologii C.difficile (CDI – Clostridium difficile Infection) – pacient vykazující rizikové faktory pro CDI přijatý k hospitalizaci s průjmem, pacient s průjmem vzniklým za hospitalizace.

Rizikové faktory infekce:

a)      Střevní dysmikrobie (antibiotická léčba)

b)      Porucha slizniční imunity GIT (nedostatečná tvorba slizničních IgA, malignity, karence bílkovin, cytostatická terapie, IBD)

c)      Imobilita střeva (stavy po operacích v dutině břišní, léky tlumící peristaltiku, gravidita)

d)     Celková imobilita (dlouhodobý pobyt na lůžku, operační výkony, revmatická, neurologická a ortopedická onemocnění)

e)      Hospitalizace (pobyt na JIP/ARO, pobyt na oddělení s předchozím výskytem klostridiové kolitidy)

f)       Léky snižující žaludeční aciditu

g)      Věk nad 65 let

Odběrový systém

Sterilní kontejner s červeným uzávěrem (sputovka).

Sterilní zkumavka s bílým šroubovacím víčkem.

Uchování před transportem

Ihned do laboratoře.

 

Mimo pracovní dobu OKM uložit do chladničky (2-8ºC), transport ihned následující den.

 

Neukládat při pokojové T, dochází k degradaci toxinů!

Transport

Pokojová T.

Poznámka

 

 3 stupňová diagnostika: imunoenzymatická metoda a PCR

1)      Screeningový test: dg. antigenu (GDH - glutamátdehydrogenáza)

2)      Detekce toxinu A a B

3)      PCR diagnostika při pozitivitě antigenu a negativitě toxinu, při pozitivitě toxinu – detekce hypervirulentního ribotypu

 

TAT (Turnaround Time):

Imunoenzymatická metoda (antigen a toxin) – do 2 hodin

Diskrepantní výsledek (Ag+/ toxin -) vyžaduje provedení PCR – do 4 hodin od příjmu

Pozitivní výsledek toxinu a PCR je hlášen jako kritická hodnota na oddělení.

Neprovádět kontrolní vyšetření jako kontrolu efektu léčby.

 

Při podezření na CDI a při pozitivitě výsledků se zavádějí izolační opatření viz OS 304, příloha 5 a 6.

 

Interpretace

 

Nedoporučuje se zasílat formovanou stolici a vzorky od dětí mladších 2 let.

 

Vyšetření antigenu má vysokou senzitivitu a vysokou negativní prediktivní hodnotu (negativní výsledek s vysokou pravděpodobností vylučuje CDI).

Antigen (GDH) pozitivní = přítomnost C.difficile ve stolici. Může se jednat o asymptomatické nosičství toxigenního či netoxigenního kmene. Může jít také o falešnou negativitu toxinu – senzitivita testu na toxin je nízká (cca 40%) - při nízké kvantitě toxinu nebo jeho degradaci při pokojové teplotě.

 

Ag pozitivní/ toxin negativní = provádí se 2.stupeň diagnostiky – PCR.

 

Metodou PCR se detekuje gen pro toxin B, gen pro binární toxin a delece v regulačním genu pro syntézu toxinů.

Výsledek:       PCR pozitivní – toxigenní kmen: ve stolici je přítomen toxigenní kmen.

 

                        PCR pozitivní – virulentní kmen: ve stolici je přítomen virulentní kmen, vysoce pravděpodobný je ribotyp 176.

                       

Doporučení pro terapii: Terapeutický algoritmus klostridiové kolitidy v sekci Dokumenty lékové komise (Intranet – hlavní strana).

Clostridium difficile Severity Index (CSI): prediktivní skórovací systém u pacientů s CDI

Parametr

0 bodů

1 bod

Hladina kreatininu

≤1,5-násobek normy

>1,5-násobek normy

Leukocytóza

< 20 000

> 20 000

Hladina albuminu (g/l)

>30

<30

 

Pacienti s CSI skóre > 2 body mají signifikantně vyšší mortalitu a proto vyžadují agresívnější iniciální  léčbu.

Neprovádět kontrolní vyšetření jako kontrolu efektu léčby. Pozitivita testů může přetrvávat delší dobu a neslouží k hodnocení efektu léčby. Negativní výsledek naopak není důvodem pro předčasné ukončení léčby. Odpověď na léčbu představuje normalizace stolice (frekvence, konzistence) a úprava celkového stavu.