Preanalytika
Pokyny k odběru |
Průjmovitá
stolice. Odběr
vzorku stolice do kontejneru s širším hrdlem. Min.
1ml stolice. |
Klinické indikace |
Diagnostika
průjmů s podezřením na etiologii C.difficile
(CDI – Clostridium difficile
Infection) – pacient vykazující rizikové faktory pro CDI přijatý
k hospitalizaci s průjmem, pacient s průjmem vzniklým za
hospitalizace. Rizikové faktory infekce: a) Střevní dysmikrobie (antibiotická léčba) b) Porucha slizniční imunity GIT (nedostatečná
tvorba slizničních IgA, malignity, karence bílkovin, cytostatická terapie,
IBD) c) Imobilita střeva (stavy po operacích
v dutině břišní, léky tlumící peristaltiku, gravidita) d) Celková imobilita (dlouhodobý pobyt na
lůžku, operační výkony, revmatická, neurologická a ortopedická onemocnění) e) Hospitalizace (pobyt na JIP/ARO, pobyt na
oddělení s předchozím výskytem klostridiové kolitidy) f) Léky snižující žaludeční aciditu g) Věk nad 65 let |
Odběrový systém |
Sterilní
kontejner s červeným uzávěrem (sputovka). Sterilní
zkumavka s bílým šroubovacím víčkem. |
Uchování před
transportem |
Ihned
do laboratoře. Mimo
pracovní dobu OKM uložit do chladničky (2-8ºC), transport ihned
následující den. Neukládat
při pokojové T, dochází k degradaci toxinů! |
Transport |
Pokojová
T. |
Poznámka |
3 stupňová diagnostika:
imunoenzymatická metoda a PCR 1)
Screeningový test: dg. antigenu (GDH
- glutamátdehydrogenáza) 2)
Detekce toxinu A a B 3)
PCR diagnostika při pozitivitě
antigenu a negativitě toxinu, při pozitivitě toxinu – detekce
hypervirulentního ribotypu TAT (Turnaround Time): Imunoenzymatická metoda
(antigen a toxin) – do 2 hodin Diskrepantní výsledek
(Ag+/ toxin -) vyžaduje provedení PCR – do 4 hodin od příjmu Pozitivní výsledek toxinu a PCR je hlášen jako kritická
hodnota na oddělení. Neprovádět kontrolní vyšetření jako kontrolu efektu léčby. Při podezření na CDI a při pozitivitě výsledků se zavádějí
izolační opatření viz OS 304, příloha 5 a 6. |
Interpretace
Nedoporučuje se zasílat formovanou stolici a vzorky od dětí
mladších 2 let.
Vyšetření antigenu má vysokou senzitivitu a vysokou negativní
prediktivní hodnotu (negativní výsledek s vysokou pravděpodobností
vylučuje CDI).
Antigen (GDH) pozitivní = přítomnost C.difficile ve stolici. Může se jednat o asymptomatické nosičství
toxigenního či netoxigenního kmene. Může jít také o falešnou negativitu toxinu
– senzitivita testu na toxin je nízká (cca 40%) - při nízké kvantitě toxinu
nebo jeho degradaci při pokojové teplotě.
Ag pozitivní/ toxin negativní = provádí se 2.stupeň diagnostiky
– PCR.
Metodou PCR se detekuje gen pro toxin B, gen pro binární toxin a
delece v regulačním genu pro syntézu toxinů.
Výsledek: PCR
pozitivní – toxigenní kmen: ve stolici je přítomen toxigenní kmen.
PCR
pozitivní – virulentní kmen: ve stolici je přítomen virulentní kmen, vysoce
pravděpodobný je ribotyp 176.
Doporučení pro terapii: Terapeutický
algoritmus klostridiové kolitidy v sekci Dokumenty lékové komise
(Intranet – hlavní strana).
Clostridium
difficile Severity Index
(CSI): prediktivní skórovací systém u pacientů s CDI
Parametr |
0 bodů |
1 bod |
Hladina
kreatininu |
≤1,5-násobek
normy |
>1,5-násobek
normy |
Leukocytóza |
< 20 000 |
> 20 000 |
Hladina
albuminu (g/l) |
>30 |
<30 |
Pacienti s CSI skóre > 2 body mají signifikantně vyšší mortalitu a proto
vyžadují agresívnější iniciální léčbu.
Neprovádět kontrolní vyšetření jako kontrolu efektu léčby. Pozitivita testů může přetrvávat delší dobu a neslouží k hodnocení efektu léčby. Negativní výsledek naopak není důvodem pro předčasné ukončení léčby. Odpověď na léčbu představuje normalizace stolice (frekvence, konzistence) a úprava celkového stavu.